การแยกพลาสมิดออกจากแบคทีเรียทำได้ง่ายและใช้อย่างมากในงานพันธุวิศวกรรม

Last Updated on Monday, 17 September 2012 16:58

พลาสมิดเป็นดีเอ็นเอชนิดหนึ่งที่อยู่นอกโครโมโซมของแบคทีเรียหลายชนิด มีรูปร่างเป็นวงแหวนเกลียวคู่ ส่วนใหญ่มีชิ้นดีเอ็นเอที่ทำให้แบคทีเรียดื้อต่อยาปฏิชีวนะ ด้วยคุณสมบัติเหล่านี้พลาสมิดจึงถูกนำมาใช้เป็นดีเอ็นเอพาหะในงานด้านพันธุวิศวกรรม คุณสมบัติการดื้อยาของดีเอ็นเอพาหะจะทำให้บอกได้ว่าแบคทีเรียผู้รับใดมีชิ้นดีเอ็นเอที่ควบคุมลักษณะที่ต้องการอยู่จึงเลือกเฉพาะแบคทีเรียนั้นมาเลี้ยงเพื่อให้จำนวนชิ้นดีเอ็นเอที่ควบคุมลักษณะที่ต้องการเพิ่มขึ้น ดังนั้นขั้นตอนการแยกพลาสมิดออกจากแบคทีเรียจึงเป็นขั้นตอนที่สำคัญและถูกพัฒนาให้ทำได้ง่าย

หลักการแยกพลาสมิดออกจากแบคทีเรีย เริ่มจากต้องทำให้เซลล์แตกโดยใช้สารละลายด่างและ SDS ซึ่งมีผลให้โครโมโซมเสียสภาพไปด้วย เมื่อปรับให้สารละลายเป็นกลางโดยใช้กรดโครโมโซมจะตกตะกอน อาร์เอ็นเอและโปรตีนจะจับกับ SDS ตกตะกอนไปด้วย หลังจากนั้นแยกพลาสมิดออกมาโดยตกตะกอนด้วยเอธิลแอลกอฮอล์

เนื่องจากพลาสมิดนิยมนำมาใช้เป็นดีเอ็นเอพาหะในงานพันธุวิศวกรรม จึงมีการสร้างพลาสมิดขึ้นมามากมายในทางการค้า ซึ่งมีคุณสมบัติที่แตกต่างกัน สามารถเลือกนำมาใช้ให้เหมาะสม

ที่มา: สุรินทร์ ปิยะโชคณากุล. "เวกเตอร์" ในพันธุวิศวกรรมเบื้องต้น. หน้า 77-105. กรุงเทพฯ : สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์, 2545.

บทความนี้มีประโยชน์มากน้อยเพียงใด: / 2
น้อยมากที่สุด